Keng ta'sir doirasiga ega antibiotik bo‘lib, Pseudomonas fluorescens fermentatsiyasi orqali olinadi. Mupirosin bakteriayalardagi oqsil sintezini buzib, izoleytsil-transfer-RNK-sintetazasini ingibitsiya qiladi. Mupirosin minimal ingibitsiyalovchi konsentratsiyalarda bakteriostatik xususiyatlarga ega, yuqori konsentratsiyalarda esa bakteritsid ta'sir ko‘rsatadi, agar mahalliy qo‘llanilsa. Uning o‘ziga xos ta'sir mexanizmi va noyob kimyoviy tuzilishi tufayli mupirosin boshqa antibiotiklar bilan xoch rezistentlikka ega emas. Gram-musbat bakteriyalarga, jumladan, teri infektsiyalarini keltirib chiqaradigan Staphylococcus aureus (shu jumladan metitsillinga, streptomitsinga, tetratsiklinga, eritromitsinga, neomitsinga, fuzid kislotasiga, linkomitsinga va levomitsinga chidamli shtammlar), shuningdek, boshqa Staphylococcus spp. va Streptococcus spp. (koaguloza-manfiy) ga qarshi faol. Gram-manfiy bakteriyalarga nisbatan ham faol: Escherichia coli, Haemophilus influenzae, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Moraxella catarrhalis, Bordetella pertussis, Pasteurella multocida, Klebsiella pneumoniae, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Enterobacter cloacae, Enterobacter aerogenes, Citrobacter freundii.